Enzim aktivitesini etkileyen faktörlerden biri pH'dır. pH'da küçük değişiklikler olursa, enzim denatüre olur ve katalitik aktivite kaybedilir.
Başka bir faktör sıcaklıktır. Enzim katalizli reaksiyonlar, sıcaklık arttıkça oranın artmasını sağlar. Enzimler protein olduğundan, denatüre olurlar ve daha yüksek sıcaklıklarda aktif olmazlar.
Enzimin konsantrasyonu da aktiviteyi etkiler. Substratın konsantrasyonu sabit tutulurken enzimin konsantrasyonu artarsa, enzim konsantrasyonu ikiye katlandıkça reaksiyon hızı ikiye katlanır. Bunun nedeni, kullanılan enzimin molar konsantrasyonunun hemen hemen her zaman substratın molar konsantrasyonundan düşük olmasıdır.
