DNA polimerazın işlevi, DNA'nın çoğaltılması, tekrar okunması ve onarılmasıdır. Birkaç DNA polimerazı vardır, ancak DNA polimeraz I veya Pol I ve DNA polimeraz III veya Pol III ana DNA replikasyonunda rol oynayanlar.
DNA polimerazı, sadece kısa bir RNA parçası olan bir RNA primerinin mevcut olduğu durumlarda nükleotit bazları ekler. DNA için nükleotit bazları, adenin, timin, guanin ve sitozinden oluşur. DNA polimeraz sonra RNA primerine saniyede 1000 baz hızında nükleotid bazlar ekler. DNA polimeraz, eklenen her 10.000 baz için sadece bir hatalı baz ekleyen, son derece hassas bir enzimdir.Bir sonraki baz eklenmeden önce, DNA polimeraz eklenen son bazın doğru olup olmadığını kontrol eder. DNA replikasyonu yüzde 100 doğru değildir; bu nedenle, yanlış bazlar bazen eklenebilir. DNA polimeraz, yanlış bazı çıkarır ve doğru olanı ekler. DNA replikasyonu, DNA polimerazın prova okuma fonksiyonu nedeniyle son derece hassastır, bu da her 1 milyar baz için bir hatayla sonuçlanır.