Doğrudan ve dolaylı ELISA arasındaki fark, dolaylı ELISA'nın ikincil bir antikor ilavesi gerektirdiği ve direkt ELISA'nın sadece bir birincil antikor kullandığıdır. Dolaylı ELISA, maddeleri tespit ederken daha hassas olarak kabul edilir, ancak doğrudan ELISA, daha az adım gerektiren daha hızlı ve daha ucuz bir işlemdir.
Direkt ELISA veya enzime bağlı immünosorbent deneyi, bir antijenin bir plakaya emilimiyle başlar. Diğer tüm olası bağlanma bölgelerini bloke etmek için bir protein eklenir. İlk antikor eklenir ve tanınmış antijen epitoplarına bağlanır. Dolaylı ELISA, birinci antikora bağlanan ikinci bir antikor ekleyerek işleme devam eder. İlk antikor yalnızca antijene bağlıysa kullanılabilir.
Her iki işlem de ilave maddeleri gidermek için çok sayıda laboratuvar yıkama gerektirir. ELISA işlemi laboratuarda önemlidir, çünkü bilim adamlarının antijenleri tanımlamasını sağlar. Hastalıkları ve gıda alerjenlerini test etmenin popüler ve güvenilir bir yoludur.
Dolaylı ELISA, daha küçük miktarlarda bir antijeni tespit edebilir ve tek bir ikincil antikorun, farklı primer antikorların bir bolluğu ile kullanılmasına izin verir. Doğrudan ELISA, bir tespit yapmak için daha yüksek antijen miktarları gerektirir ve sadece bir antikor kullanıldığı için esnek değildir.