Sporları boyarken ısı gereklidir çünkü ısı uygulaması vejetatif hücreleri bozar ve yeşil malakitin onlardan durulanmasına neden olur, bu da hücrelere karşı havşaya izin verir. Bu, kesin olarak gerekli bir adımdır. geleneksel spor boyama yöntemlerine dirençli sporlar.
Austin Community College'a göre, boyama bilim adamları tarafından bir bakteri örneğindeki sporları tanımlamak için kullanılan bir tekniktir. Spor boyamadaki en önemli adımlardan biri, analiz edilen sporun özelliklerini tahmin etmektir, çünkü bazıları geleneksel boyama işlemlerine karşı dayanıklıdır. Sıklıkla bu, keratin olarak bilinen sert dış protein protein katmanlarının bir sonucudur. Bu tür endosporlar için, sporları birincil lekeleri olan malakit yeşili ile lekelemek için bir ısı boyama tekniği kullanmak gerekir.
Isı uygulaması bir hücrenin duvarını zayıflatır ve boyaların durulanmasına ve geçirilmesine izin verir. Bir endosporu oluşturan orijinal hücreye bitkisel hücre denir. Bu hücreler, endosporların kendilerinden daha fazla ısıya duyarlıdır ve malakit yeşili ile durulanabilir ve boyanabilirler. Endosporların şişmesine ve reaksiyonlarına dayanarak, bu boyama işlemi sert koruyucu tabakaları olan sporları tanımlamak için kullanılabilir.