Vampir yarasalarının doğal yaşam alanı ılık, tropik ya da subtropikal bir ortamdır. 2400 metreye kadar yüksekliklerde bulunurlar ve genellikle orta derecede aydınlatılmış alanlarda yaşarlar.
Vampir yarasalar yaklaşık 100 yarasa kolonisinde yaşar, ancak tek bir kolonide 1.000 kadar veya daha fazla olabilir. Bu koloniler mağaralarda, ağaç oyuklarında, terk edilmiş binalarda, eski maden millerinde ve diğer karanlık yerlerde yaşar. Gün boyunca uyuyorlar, ikametlerinin tepesinde baş aşağı duruyorlar ve geceleri avlanmak için çıkıyorlar. Vampir yarasalar avlarının ılık kanına dayanan tek memelilerdir, tipik olarak sığırlar, atlar veya diğer çiftlik hayvanları.