Gram negatif basil, iki membran arasında ince bir peptidoglikan tabakasına sahip olan çubuk şeklinde bakterilerdir. Birçok suş, insanlarda enfeksiyona neden olabilecek Enterobacteriaceae familyası dahil, insanlarda enfeksiyona neden olabileceğinden tıbbi olarak önemlidir. Escherichia coli, Salmonella spp. ve Shigella spp., enfeksiyon ağını belirtir.
Gram boyama sırasında, pozitif veya negatif olup olmadığını belirlemek için bakteri örneğine kristal menekşe lekesi uygulanır. Bir renk verici madde, genellikle alkol veya aseton uygulanır ve bu, peptidoglikan tabakasını sıkılaştırır. Gram-negatif bir bakteride, dış zar bu işlemle parçalanır ve ince peptidoglikan tabakası kristal menekşe boyasını tutamaz. Havşa safranin uygulandıktan sonra, Carleton Koleji Bilim Eğitim Kaynak Merkezine göre Gram negatif hücreler kırmızı görünür.
Birçok Gram-negatif basil türü insanlara zararlıdır. Enterobacteriaceae, insanlarda enfeksiyona neden olduğu tespit edilen 14'ün üzerinde gen bakteri içeren bir Gram negatif basil ailesidir. Bunlardan en önemlisi, idrar yolu enfeksiyonlarının çoğuna neden olan ve aynı zamanda gastrointestinal sistemin polimikrobiyal bozulmasında bir faktör olan Escherichia coli'dir. Diğer önemli cinsler, gastroenterite neden olan Salmonella, enterik ateşe neden olan Salmonella typhi ve dizanteri yaygın bir nedeni olan Shigella, enfeksiyona işaret eder.