Julius Sezar'ın düşmanları hayatı boyunca değişti. Ölümündeki en önemli düşman 44 B.C. Marcus Junius Brutus (Shakespeare'in ünlü "Et tu, Brute?" muhatabı) ve Gaius Cassius Longinus idi.
Sezar, uzun zamandır arkadaşı Gnaius Pompeius Magnus (Pompey) ve Marcus Licinius Crassus ile 60 B.C. Bu, Birinci Triumvirate olarak bilinir ve sadece 50'li yılların başlarına kadar sürdü. Pompey, Triumvirate'ın dağılmasından sonra yavaş yavaş Sezar'ı açtı.
Sezar Rubicon'u geçtiğinde ("iacta alia est" veya "kalıp atılır" ifadesinin kökeni), birçok düşman yaptı; Senato'nun büyük bir kısmı nehri geçerken onu azarladı. Profesyonel ve Sezaryen karşıtı anlaşmazlıklar İç Savaşı başlattı. Pompey, bu sırada Roma'dan kaçtı ve Sezar'ın düşmanın çok güçlü olduğundan korkuyordu.
Genç Cato, İç Savaş sırasında Sezar'ın düşmanı oldu. Cato, katı bir ahlak kuralına ve toplumsal ciddiyete inanırken, Caesar, sosyal reformlar ve iktidarı senatondan uzaklaştıran yeni bir hükümet sistemi için konuştu. Cato, Sezar'dan kaçtı ve sonunda Sezar'ın yeni siyasi sisteminden korkan ve düşmanı tarafından affedilmek istemeyen kendisini öldürdü.
Brutus, Sezar'ın en ünlü düşmanıydı. Eskiden Sezar'ın yakın bir müttefiki olan Brutus'un gizlice onu açtığı ve Sezar'a ölümcül saldırının başladığı söyleniyor (15 Mart, 44 B.C.).
